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944cc天天好彩猛料母种的制作方法

2019-05-22

  944cc天天好彩猛料母种的制作方法

  1、培养基配方

  ①、黄豆芽500克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,羊肚菌基脚~50克,水1升。

  ②、黄豆芽500克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,水1升。

  ③、栎木屑500克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,水1升。

  ④、马铃薯200克(煮汁),白糖20克,琼脂20克,蛋白胨0.5克,牛肉膏0.5克,水1升。

  ⑤、蛋白胨1克,葡萄糖20克,琼脂20克,酵母膏1克,磷酸二氢钾1克,硫酸镁1克,维生素B1,1克,水1升。pH值自然。

  上述配方任选一组。将木屑或豆芽加水1升煮30分钟,过滤取汁,并将余下的水补足1升,加入其它原料,煮至溶化后,按母种制作常规方法,分装于18毫米×180毫米或20毫米×200毫米试管的1/5,塞上棉塞,使用高压灭菌锅彻底灭菌;在0.68千克压力下维持60分钟,自然冷却至指针回到原位才可打开,放成斜面备用。

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  2、菌种分离

  首先要具有食用菌专业基础知识、多年的菌种分离经验及菌丝鉴别能力,其次要购置母种培养基、无菌接种箱、恒温培养箱、冰箱、高倍显微镜等必要设备。根据当地羊肚菌生长季节,趁羊肚菌生长旺盛时做菌种分离工作。

  ①、分离方法

  羊肚菌的分离方法与其它食用菌大不相同。它需要一种助生菌与羊肚菌菌丝共生时才能出菇。这种助生菌长期活动在土壤中,有时以芽孢菌形式出现,有时以菌丝形式出现。它为羊肚菌的原基形成和子实体生长发育起着至关重要的作用。因此,从土壤中分离该菌比其它任何方式分离要好些。但从土壤分离难度太大,成功率不到万分之一,并且难以分辨,所以只有采取羊肚菌基脚土分离,才能真正找到羊肚菌的出菇菌丝。初学者可在四川绵阳市食用菌研究所购买培养好的羊肚菌优良母种,并参加现场培训。

  ②、操作过程

  在羊肚菌生长的周围,可见白色菌丝充满土壤。从土壤中挑选这种菌丝容易成功。现介绍两种土壤分离的简易方法:一种是土壤直接分离,另一种是浸提分离。土壤直接分离法:在羊肚菌生长的地方去掉羊肚菌,取周围5厘米以内的土壤,去掉表层,把土壤放入无菌接种箱内,然后放入试管培养基,进行接种箱空间消毒。即按接种箱每立方米空间用甲醛10毫升,高锰酸钾5克,混合产生气体消毒,半小时后才可操作。将基脚土用接种针挑取黄豆大小一块,迅速放到试管内的空白培养基上,每管放一块,塞上棉塞,接种后取出培养。浸提分离法:将基脚土用无菌水稀释,澄清后用接种针蘸取少量溶液,滴到试管内的空白培养基上,塞上棉塞后取出 培养。

  分离后,放在12~18℃温度下培养观察。3天后培养基上萌发菌丝,每天仔细检查每支试管的发菌及变化情况。区分和认识各类杂菌是最关键的核心技术。真正的羊肚菌菌丝最初为灰白色,生长很快,时间长会变成棕黄色,有时会出现菌核,母种7天长满试管,原种、栽培种15天可长满瓶底。是否分离成功,必须做栽培出菇试验,待出菇后才能准确认定是否羊肚菌的菌种。一旦菌种分离成功,在以后的转接过程中要小心,不能再让杂菌感染,必须把好高温灭菌关和接种消毒关,才能保证菌种质量和成活率。

  3、转接提纯

  待培养基表面余水干后才能使用,否则会被细菌感染。接种要求在接种箱内通过药物灭菌进行,将一代纯母种挑取黄豆大一块带菌丝的培养基,放入空白培养基上,每支母种可接10~15支,母种只能扩种一次,不能多接或多扩,否则会影响子实体生长。

  4、培养

  接种后放在18~22℃温度下避光培养,2~3天菌丝萌发,7天可长满斜面培养基。如不使用则放入冰箱在0~3℃温度下保存,时间最长不超过半年。


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